Inżynieria bioprocesowa - dezintegracja.docx

Judyta Baczmaga, 206069

Artur Nowicki, 206290

INŻYNIERIA BIOPROCESOWA – Zajęcia laboratoryjne

Ćwiczenie nr 4

Temat: Dezintegracja ultradźwiękowa

1.       Cel ćwiczenia:

Celem ćwiczenia było zbadanie i opisanie wpływu ultradźwięków na drożdże Saccharomyces cerevisiae.

2.       Przebieg ćwiczenia:

Przygotowano 6 probówek wirówkowych. Do jednej dodano 5 cm3 wody destylowanej, a do pięciu pozostałych 5 cm3 zawiesiny drożdży. Cztery z probówek zawierających drożdże poddano dezintegracji ultradźwiękowej. W probówkach z dezintegracji oznaczano białko po 1, 2, 4 oraz 10 minutach. W probówce z wodą destylowaną oraz w probówce z drożdżami od razu oznaczono zawartość białka (t=0). W tym celu probówkę odwirowano. Następnie z probówki wirówkowej do szklanej przeniesiono 4 cm3 zawiesiny. Dodano 3 cm3 NaOH i wstawiono łaźni wodnej na 10 minut. Po upływie tego czasu przeniesiono 2cm3 supernatantu do czystej probówki i dodano 5 cm3 roztworu D. Po 30 minutach dodano 0,5 cm3 odczynnika Folina-Ciocalteu’a. Odstawiono na 30 minut. Następnie dokonano pomiaru absorbancji przy długości fali =750mm wobec próby kontrolnej.

3.       Wyniki:

Wyniki pomiaru absorbancji przedstawiono w tabeli poniżej:

4.       Wnioski:

W pierwszej minucie dezintegracji ilość białka gwałtownie rośnie. Jest to spowodowane tym że fala ultradźwięków pobudziła komórki drożdży do rozmnażania. Następnie spada i ponownie wzrasta. Otrzymany wykres nie odpowiada sytuacji, jaka powinna nastąpić pod wpływem działania ultradźwiękami na drożdże. Na prawidłowym wykresie ilość białka powinna najpierw wzrosną a wraz z upływem czasu maleć, ponieważ  w procesie dezintegracji ultradźwiękami ściana komórkowa drożdży ulega uszkodzeniu. Im dłużej drożdże poddawane są dezintegracji tym ściana komórkowa jest coraz bardziej uszkodzona.