Judyta Baczmaga, 206069
Artur Nowicki, 206290
INŻYNIERIA BIOPROCESOWA – Zajęcia laboratoryjne
Ćwiczenie 4
Temat: Inżynieria bioreaktorów
1. Cel ćwiczenia:
Celem ćwiczenia było zapoznanie z podstawowymi zagadnieniami dotyczącymi prowadzenia procesów biochemicznych w urządzeniach zwanych bioreaktorami
2. Przebieg ćwiczenia:
· Do bioreaktora dodano roztwór glukozy w takiej objętości aby jej stężenie w całej objętości zawiesiny drożdży wynosiło 1g/dm3. Po kilkunastu sekundach pobrano 25cm3 pierwszej próby (próba 0) i oznaczono zawartość cukru. Kolejne próby pobierano pobrano po 3 min, 6 min, 10 min, 20 min, 40 min oraz 70 min.
· Do 25 cm3 próby w zlewce dodano 1,25cm3 odczynnika A oraz 1,25cm3 odczynnika B, dokładnie wymieszano. Za pomocą 2M NaOH doprowadzono do pH ok. 8 (kilka kropel). Całość przesączono przez sączek karbowany. Dla każdej próby z określonego czasu przygotowano dwa powtórzenia, czyli dwie probówki. Do każdej z nich dodano po 1cm3 próby, 1 cm3 odczynnika C i po 5 cm3 wody destylowanej. Przygotowano także próbę odczynnikową używając 1 cm3 wody destylowanej zamiast próby.
· Zawartość wszystkich probówek dokładnie wymieszano, każdą przykryto kawałkiem folii aluminiowej i wstawiono na 5 min do łaźni wodnej. Po upływie tego czasu probówki schłodzono pod strumieniem zimnej wody i zmierzono absorbancję przy długości fali 550nm. Jako próbę odniesienia zastosowano próbę odczynnikową.
3. Wyniki:
Tab.1. Pomiar absorbancji prób.
Wyniki pomiarów
Czas inkubacji, min
0’
3’
6’
10’
20’
40’
70’
Próba I
0,172
0,291
0,066
0,076
0,059
0,018
0,065
Próba II
0,159
0,362
0,082
0,037
0,056
0,029
0,010
Średnia
0,166
0,074
0,057
0,058
0,024
Bioreaktorem w ćwiczeniu była zawiesina drożdży, do której wprowadzono glukozę otrzymując roztwór o stężeniu 1 g/dm3.
C1=Vs*C2Vroz → Vs=C1*VrozC2=1 gdm3*1,5 dm350 gdm3=0,03 dm3=30 cm3
Próby po 3 minutach inkubacji odrzucono z powodu widocznej mętności, która przy pomiarze absorbancji zawyżyła wyniki, czyniąc je niemiarodajnymi. Pierwsza próba oznaczona po 70 minutach również była zanieczyszczona, więc nie uwzględniono jej przy wyznaczaniu średniej wartości.
4. Wnioski:
dzudas24