DIAGNOSTYKA GRZYBÓW PATOGENNYCH
Posiewy materiałów klinicznych
Identyfikacja
Grzyby drożdżopodobne
Grzyby pleśniowe
Identyfikacja (agary selektywne, testy, oznaczanie wrażliwości na leki)
Izolacja szczepów
Inkubacja 30°C
Fungitest – BioRAD
ATB Fungus 3 – BioMerieux
E-testy –AB Biodisc
Płyny ustrojowe
Inkubacja w temperaturze pokojowej
Posiew na
DTM
Agar Sabourauda z chloramfenikolem
Agar Sabourauda
Materiały ze skóry, paznokci, włosów
Wirowanie
Podłoże selektywne
Krew bezpośrednio na podłoże płynne (BACTEC Mycosis)
posiew na agar Sabourauda
Tkanki, wycinki
(rozdrobnione skalpelem)
Plwocina, wymazy
Inne materiały
posiew osadu na agar Sabourauda
Interpretacja wyników posiewów
1) W posiewach plwociny, materiałów pobranych podczas bronchoskopii i innych z górnych dróg oddechowych mogą pojawiać się pojedyncze kolonie grzybów z rodzajów Aspergillus, Penicillium, Alternaria, Cladosporium będące wynikiem naturalnej inhalacji grzybów wraz z wdychanym powietrzem
2) U osób z obniżoną odpornością obecność pojedynczych kolonii Aspergillus fumigatus czy Aspergillus spp., w posiewach tych samych materiałów należy oceniać z rozwagą gdyż mogą one być sygnałem rozpoczynającej się inwazyjnej aspergilozy
3) W przypadku wyhodowania grzybów drożdżopodobnych z moczu należy wykluczyć kontaminację pochodzącą z krocza (pochwa, napletek, odbyt)
4) Wzrost grzybów drożdżopodobnych uzyskanych w posiewach plwociny może również wskazywać na kolonizację śluzówek jamy ustnej lub protez zębowych lub świadczyć o diecie pacjenta
Diagnostyka grzybic
Organizm
Direct micro
Kultury
Total
C. albicans
24h
48h
3h
2-3 dni
Inne drożdże
72-96h
5-8 dni
Dermatofity
14-28 dni
1-28 dni
14-42 dni
Inne pleśniowe
5-28 dni
5-42 dni
Identyfikacja grzybów drożdżopodobnych
ID32
Fungscreen 4H
Auxacolor
API 20C AUX
Cryptococcus spp.
Identyfikacja I32C, API Candida, Auxacolor,
API 20C AUX, VITEK YBC, Fungiscreen 4H
Filamentacja (-)
Chlamydospory (-)
Kolonie białe lub kremowe
Brązowe kolonie
Filamentacja (+)
Chlamydospory (+)
Candida albicans
Test filamentacji lub na chlamydospory
ID32C
Auxacolor lub
Rhodorhorula spp.
Pullularia spp.
Aureobasidium spp.
Exophiala spp.
Phialophora spp.
Kolonie czarne
Kolonie różowe do czerwonych
Preparat w kropli tuszu lub Alzian blue
Dalsza identyfikacja wg odpowiednich kluczy
Cyptococcus neoformans
Podłoże z
????
Kolonie masłowate
Kolonie śluzowate
Otoczki (+)
Otoczki (-)
Grzyby drożdżopodobne identyfikuje się w oparciu o cechy biochemiczne, używając
· Candi select (BioRad)
· ID albicans, ID albicans 2 (BioMerieux)
· ChROMagar Candida (Becton Dickinson)
· ChROMagar Candida (Grasso)
· API Candida, ID32C, 20 C AUX, Karty YBC (BioMerieux)
· Auxacolor, Fungiscreen (BioRad)
Testy serologiczne
Materiał do badania
- Surowica
- Płyn mózgowo-rdzeniowy
- Inne płyny ustrojowe
Poszukiwanie
a) Przeciwciał przeciw antygenom grzybów
· Metoda DD – podwójna dyfuzja w żelu agarozowym według Ouchterlony’ego
· Metoda CIE – immunoelektroforezy przeciwstawnej
· ELISA – Platelia Candida Ap. BioRad
b) Antygenów krążących grzybów
...
jiso